文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

    1.1.1 样品来源

    1.1.2 主要试剂及仪器

    1.1.3 试验动物

1.2 方法

    1.2.1 细菌分离培养

    1.2.2 生化鉴定

    1.2.3 16S rRNA基因扩增

    1.2.4 khe基因扩增

    1.2.5 药敏试验

    1.2.6 小鼠致病性试验

2 结 果

2.1 细菌分离培养结果

2.2 生化鉴定结果

2.3 16S rRNA基因鉴定结果

2.4 khe基因鉴定结果

2.5 药敏试验

2.6 小鼠致病性试验

3 讨 论

4 结 论

文章摘要:为了阐明引起石河子地区某规模化奶牛场犊牛呼吸道症状的主要细菌性病原体及其生物学特性,本研究采集2～6月龄犊牛鼻拭子与肛拭子各39份,通过细菌分离培养、形态学观察、生化分析、PCR扩增16S rRNA基因和溶血酵素(khe)基因、药敏试验和小鼠致病性试验等方法对分离菌株的生物学特性进行分析。结果显示,分离菌株中有3株在MIAC平板上形成紫红色带有沉淀环的菌落(鼻拭子1株,肛拭子2株),且镜检为革兰氏阴性短杆菌,疑为肺炎克雷伯菌。全自动微生物分析系统显示,分离株与肺炎克雷伯菌相似性均为96%;PCR扩增16S rRNA基因测序结果显示,分离株与GenBank数据库中肺炎克雷伯菌核苷酸相似性在96.5%～99.8%之间,肺炎克雷伯菌特异性基因khe阳性且相似性达99%以上;药敏结果显示,分离菌株对青霉素类、头孢菌素类、一代和二代氨基糖苷类、四环素类、一代大环内酯类、磺胺类、多烯类、林可酰胺类抗菌药呈现出不同程度的耐药;对三代氨基糖苷类、二代大环内酯类、氯霉素类、多肽类、喹诺酮类抗菌药敏感,且呈现不同程度的多重耐药性;致病性试验结果表明,分离菌株均可不同程度导致小鼠死亡且以鼻拭子分离株致病性较强。本研究成功分离鉴定石河子地区规模化奶牛场引起犊牛呼吸道症状的肺炎克雷伯菌3株,并阐明分离菌的部分生物学特性,为新疆地区牛源肺炎克雷伯菌病的检测、诊断及临床治疗提供技术支撑。

文章关键词:肺炎克雷伯菌,分离,鉴定,致病性,耐药性,

论文作者:吴桐忠² 赵玉宾¹ 张星星² 韩猛立² 钟发刚² 胡建军¹ 黄新² 

作者单位:1. 塔里木大学动物科学学院 

论文DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2021.09.039

论文分类号: S852.61

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文章来源：《畜牧兽医科学》 网址: http://www.cmsykx.cn/qikandaodu/2021/0907/956.html