0 引言

人工授精技术能有效利用优良种公鸡的优势，繁殖出性能优良的后代，同时能克服自然交配的难点和局限性，降低养殖成本，是目前养鸡业广泛应用推广的一项技术。权凯[1]等报道如果精子活力高于0.6，则每次输入母鸡0.2×108个精子就足够，公鸡每次交配可射出15×108～80×108个精子。鸡精液稀释后再等量输精，尽管输入精子总数减少，但孵化率不受影响甚至还有所提高。精液离体后，主要有3种因素影响其活力：外界环境、光、紫外线等；精子本身代谢活动；操作过程中的振荡。黎丽霞[2]等研究发现，输精无论采用原精液还是稀释精液，当精液量达到一定水平后，再增大精液量，也不能提高母鸡受精率，以及延长母鸡受精持续时间。当精子数量一定时，精液稀释对母鸡受精率和受精持续时间的影响不显著。精液低倍稀释后精子数量能满足母鸡受精需求，目前市场已有商品化鸡精液稀释液的相关产品，本研究对比评估选择理想的稀释液，并建立科学的使用方法，以期提高工作效率，降低公鸡饲养成本。

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1 材料与方法

1.1 材料

市场采购商品化的鸡精液稀释液A、B、C 3种，分别通过实验室测定筛选对精子活力影响较小的稀释液。选择温氏下属某黄羽肉鸡种鸡场产蛋15周龄前后的竹丝鸡和土2号父母代种鸡，进行同群对比试验。试验鸡群除人工授精时对精液进行稀释外，饲养技术方案等条件严格执行温氏集团发布的父母代种鸡饲养技术参考标准。

1.2 主要仪器

伟力彩色精子质量检测系统（WLJY-9000型，北京伟力新世纪科技发展股份有限公司）、METTLER TOLEDO台式pH计（FE28型，梅特勒-托利多国际国际贸易有限公司）、恒温水浴锅（智能控温型，嘉兴俊思电子有限公司）。

1.3 精子活力检测方法

稀释液预温至40 ℃，精液等比例稀释后分别放置在相应的恒温水浴锅中保存，检测时放置在40 ℃恒温工作台（模拟母鸡体内输卵管温度）。通过精子动态分析系统自动读取精子活力数据，每个处理设置3个重复。

1.4 现场生产数据收集

在同栋鸡舍进行试验组和对照组分群，独立收集孵化种蛋，每批次各入孵7 560枚种蛋，使用同台依爱巷道式孵化机进行常规孵化。孵化温度为37.9 ℃，孵化湿度52%，孵化至第18天落盘时分别统计各组活胚率数据。

1.5 统计与分析

数据采用Excel进行整理，采用SAS9.2软件进行单因素方差分析及DUNCAN多重比较显著性差异，结果以（平均值±标准差）表示。

2 结果与分析

2.1 稀释液筛选评估

使用WLJY-9000型精子质量检测系统，实验室评估公鸡精液被不同稀释液等温1∶1稀释后的精子活力。A稀释液稀释精液后0.5 h和2 h精子活力分别为93.3%和56.1%，稀释和保存效果相比其他各组较理想（P＜0.05）；B稀释液稀释精液后0.5 h和2 h精子活力分别为94.8%和0，能在0.5 h内较好的稀释精液（相比A之外的各组P＜0.05），但无法延长保存时间；C稀释液和生理盐水效果较差，无法用于精液稀释。见表1。

2.2 建立稀释液使用方法

为验证A精液稀释液的现场使用效果，温氏集团下属2家公司分别进行同鸡群内的对比试验，试验组为使用A稀释液进行1∶1稀释后人工授精，对照组为使用原精人工输精，2组输精时间均为25 min。使用稀释液后受精率比对照组提高0.6%～1%。见表3、表4。

为大生产中使用A精液稀释液得到更好的受精率，实验室对比评估20～40 ℃保存稀释后精液的精子活力。40 ℃精子活力最佳，且1.5 h内精子活力处于较好状态。不同温度保存，均呈现随时间延长精子活力逐渐下降的趋势。该结果为集中采精，延长输精时间、降低采精频率奠定了实验室数据支撑。见图1。

2.3.2 A精液稀释液对延长输精时间的效果

在研究过程中，对个案教师PCK发展现状的搜集思路如下：首先，通过对个案教师某一课题的两次教学进行课前访谈、课堂观察、课后访谈，初步了解其PCK的现状，特别是通过课堂教学实践后的发展情况，得出关于个案教师PCK发展现状的初步结论；其次，再另选一个课题，采用同样的方法进行研究，进一步确认在第一次教学的研究中得到的结论.本研究中张老师的两个课题依次为“垂直平分线的性质(一)”和“垂直平分线的性质(二)”.

2.3.1 A精液稀释液对鸡群受精率的影响

为对比精液不同稀释比例对受精率的影响，试验选择同群种鸡进行群内对比试验，输精周期为6 d，人工授精3轮次后开始收集种蛋，连续统计各组6批次种蛋受精率。受精率最高的为1∶1稀释，其次是1∶3，从1∶1到1∶3稀释后受精率与原精对照组相比，均无明显差异（P＞0.05），但1∶4稀释后受精率显著下降（P＜0.05）。因此，生产上推荐1∶1稀释，公鸡紧张等情况下，可使用1∶2～1∶3稀释。见表2。

为应对实际生产中因选育种、公鸡集中式饲养模式等特殊因素，需长时间保存精液的情况。试验对比精液在等温等倍稀释后，在冷藏（8 ℃）条件下，使用A精液稀释液的保存效果。结果显示，1∶1稀释后精子活力在24 h内能有效保持较高水平（＞80%），但原精无法直接冷藏长时间保存。见图2。

2.3 稀释液在实际生产中使用效果

2.2.3 明确精液稀释比例

2.2.1 保存温度和保存时间

妻子起床去跳广场舞，闺女起床去上学，我依旧赖在被窝里睡懒觉。过去的早上，葱花油盐，紧张忙碌。现在的早上，鼾声缭绕，清闲安静。妻子跳舞回头，早饭顺手提回来。我赶紧地起床刷牙洗脸，吃罢早饭去上班。

2.2.2 低温保存效果评估

终于开始顺利地登记，与上一次不同，那些工作人员这一次仿佛圣徒见到了真正的神。他们对西双崇拜得五体投地，他们说活这么大还从来没有见过这样好的男人。他们对西双和楼兰的事情问长问短，直把西双问得烦不胜烦。楼兰始终静静地躺着，身上盖了厚厚的被子，她抖着身体，却把西双的手抓得更紧。她看一眼西双，看一眼窗口的工作人员，再看一眼西双，目光飘忽不定，却有着柔软潮湿的主调。头顶的吊瓶，不紧不慢地往她的身体里补充着最后的生命之泉。

将输精时间由常规25 min延长至1.5 h，增加单次采精量，大幅降低采精频率。连续记录15批次种蛋，与常规的25 min对照组相比，受精率无显著差异（P＞0.05）。见表5。

3 讨论

本研究成功筛选出相对理想的精液稀释液，该稀释液能有效保证精液稀释后0.5 h内的精子活力，且对精液进行等倍稀释后种蛋受精率能提高0.6%～1%。使用特定稀释液从1∶1到1∶3稀释后受精率与原精对照组相比，均无明显差异（P＞0.05），与先前的研究结果基本一致[3-4]。其中通过分别选择受精率水平较高和较低的鸡场进行试验，蔡文杰[3]等对比了稀释液在受精率水平较高（94%以上）种鸡场和受精率水平较低（80%左右）种鸡场的使用效果，表明受精率大于94%的种鸡场，精液稀释组受精率显著高于原精组（P＜0.05）。王志成[4]等指出淮南麻黄鸡种母鸡原精液、1∶1稀释、1∶2稀释精液输精，受精率和孵化率无显著差异（P＞0.05）。因此，在受精率指标正常的种鸡场选择理想的稀释液对原精液进行稀释，受精率不会受到负面影响。

考虑到海上平台空间限制，CDFU在常规旋流溶气气浮基础上作了多方面的技术改进，减小设备占地面积，并进一步提升了处理性能，相关创新如下。

通常精子活力对温度较敏感，且不宜在体外停留过长时间。本研究精液被特定稀释液等倍稀释后，对比了20～40 ℃范围内精子活力的差异，发现40 ℃保存、1.5 h内精子活力能处于较好状态，实际生产中验证了使用该稀释液在40 ℃下输精时间由常规的25 min延长至1.5 h，受精率不受影响。江永辉[5]指出精子在20 ℃环境下比0 ℃和40 ℃活胚率更高，但正常舍温下无需采取控温措施，胡善虎[6]对精液保存温度在20～35 ℃范围内进行了细化分组，进一步指出精液在0.5 h用完的情况下，30～35 ℃比25～30 ℃和20～25 ℃高2%～4%。徐松山[7]等使用BPSE稀释液对新鲜精液进行1∶1稀释后输精，在不影响受精率的前提下可提高公鸡配种能力，在需要短期保存精液后进行输精时，可将采集的新鲜精液离心去除精浆并进行稀释，保存于4 ℃，进而降低精子活力的下降幅度，维持受精能力，但张晓华[8]等指出鸡精液在先冷藏再等温稀释的情况下，高倍稀释的鸡精子活力显著低于低倍稀释（P＜0.05），而在先等温稀释后冷藏的情况下，高倍稀释与低倍稀释的鸡精子活力差异不显著（P＞0.05）。在体温预热稀释液的前提下，先添加稀释液再采精、先采精再添加稀释液以及原精组，各组之间受精率与孵化率没有显著差异（P＞0.05）。研究发现等温等倍稀释后的精液冷藏保存（8 ℃）24 h内，精子活力能有效保持较高水平（高于80%），且原精无法直接冷藏长时间保存。

抽象执行的本质是在抽象域将程序变量的抽象表示形式作为程序变量本身带入程序进行计算。首先要对程序的变量和程序中的函数操作进行抽象表示，然后抽象域中执行程序的运行过程。

4 结论

精液被特定稀释液稀释后，在适宜的保存温度、保存时间、稀释比例等条件下，可有效保证精子活力和种蛋受精率。研究结果在温氏集团下属种鸡场成功推广使用，有效减少公鸡饲养成本，提高人工授精工作效率。

参考文献

[1]权凯，刘健，黄炎坤，等.鸡精液常温稀释液人工授精的效果研究[J].黑龙江畜牧兽医，2011（15）：64-65.

[2]黎丽霞，宁中华.输精量和精液稀释对母鸡受精持续时间的影响[J].中国家禽，2017，39（18）：7-10.

[3]蔡文杰，张晓华，李闯，等.受精率指标在种鸡场精液稀释技术推广中应用价值分析[J].中国家禽，2017，39（15）：70-73.

[4]王志成，汪江先，何鑫鑫，等.淮南麻黄鸡种公鸡精液稀释和输精周期对繁殖性能的影响[J].中国家禽，2019，41（4）：71-72.

[5]江永辉.影响鸡离体精液质量的几个因素[J].中国禽业导刊，1999（9）：15-16.

[6]胡善虎.鸡精液的保存温度、稀释倍数、输精量对受精率影响的试验[J].当代畜牧，1990（2）：43，6.

[7]徐松山，孙研研，李云雷，等.稀释和低温保存对鸡精液品质和受精能力的影响[J].畜牧兽医学报，2017，48（4）：645-651.

[8]张晓华，孙鏖，朱立军，等.鸡精液稀释打击影响因素及其应用价值分析[J].中国家禽，2017，39（1）：6-10.